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 一、倍率、數值孔徑與視場數

顯微鏡的綜合倍率是物鏡倍率G1與目鏡倍率G2的乘積,G=G1×G2。G1是1~100倍,G2是5~20的範圍。
數值孔徑(Numerical Aperture)N.A.是決定物鏡的分辨率、焦深、圖像亮度的基本數據,如圖所示,當物鏡焦點對好後,物鏡前透鏡最  邊緣處的傾斜光線與顯微鏡光軸所交角成α,此即該物鏡的半孔徑角設標本數據空間的折射率為n,則N.A.=n×sinα。
n通常在空氣中為1,在物鏡與標本間浸入水、甘油、油脂時,該標本折射率,即隨浸液不同而異。這種物鏡稱為浸液系物鏡;如是空氣時,稱為乾燥系物鏡。圖1左半部分表示浸液系,右半部分表示乾燥系的情況。
在顯微鏡上,限制視野的裝置是視野光圈。以物鏡側觀看這種視野光圈時的直徑以mm單位表示的值稱為視野數。實際視野=視野。
實際視野=視野數/物鏡倍率
例如,視野數為20,則10×物鏡就觀看2mm視野範圍。應用聚光鏡時,根據可變的視野光圈,再決定選用聚光鏡的N.A.值,其值是取決於可變聚光鏡孔徑光圈來確定。

二、何謂顯微鏡的解像力
1.可被視為兩獨立個體之分離兩點間的最小距離。
2. 解像力取決於所使用的光之波長,波長愈短,其解像力愈高。為了提高解析力以縮短光 源之波長為最有效之方法。
3.可見光的波長範圍由400nm到700nm。
顯微鏡其解像力之公式α=0.61λ/NA, α為解像力,λ為波長,N為光折射率,數值孔徑(Numerical Aperture)N.A。 NA值以油鏡最佳約1.4,故光學顯微鏡解像力之極限以自然光時為0.25μ,(2500A°)以單色4,000A°之光源時為0.17μ。以光學顯微鏡無法區分小於0.2μ大小之結構。


三、暗視野
一種具有暗視野聚光鏡,從而使照明的光束不從中央部分射入,而從四周射向標本的顯微鏡。暗視野顯微鏡由於不將透明光射入直接觀察系統,無物體時,視野暗黑,不可能觀察到任何物體,當有物體時,以物體衍射回的光與散射光等在暗的背景中明亮可見。在暗視野觀察物體,照明光大部分被折回,由於物體(標本)所在的位置結構,厚度不同,光的散射性,折光等都有很大的變化。

四、相位差
1.相位差顯微鏡的結構: 
相位差顯微鏡,是應用相位差法的顯微鏡。因此,比通常的顯微鏡要增加下列附件: 
(a).裝有相位板(相位環形板)的物鏡,相位差物鏡。 
(b).附有相位環(環形縫板)的聚光鏡,相位差聚光鏡。 
(c).單色濾光鏡-(綠)。
2.功能說明如下: 
(a).相位板使直接光的相位移動90°,並且吸收減弱光的強度,在物鏡後焦平面的適當位置裝置相位板,相位板必須確保亮度,為使衍射光的影響少一些,相位板做成環形狀。 
(b).相位環(環狀光圈)是根據每種物鏡的倍率,而有大小不同,可用轉盤器更換。 
(c).單色濾光鏡係用中心波長546nm(毫微米)的綠色濾光鏡。通常是用單色濾光鏡入觀察。相位板用特定的波長,移動90°看直接光的相位。當需要特定波長時,必須選擇適當的濾光鏡,濾光鏡插入後對比度就提高。此外,相位環形縫的中心,必須調整到正確方位後方能操作,對中望遠鏡就是起這個作用部件。
3.使用時注意事項: 
使用時,最重要的注意事項為下列三點: 
(a).執行正確的操作方法。 
正確操作的最重要事項必須正確地調整好相位環的中心。 
(b).根據標本的要求,選擇合適的相位差物鏡。 
(c).用其他觀察方法作比較,對標本作出正確的判斷。
 

五、偏光顯微鏡
為光源與標本間及物鏡與目鏡間各裝有1片偏光板的顯微鏡.當偏振光通過標本材料時分為折射率不同的光,這些光線在受到另一枚偏光板干涉時,會出現各種不同顏色的干涉色;偏光顯微鏡主要是用來鑑別岩石中所含的各種不同礦物,所以也稱為礦物顯微鏡.
 

六、螢光顯微鏡
以紫外線為光源,使被照射的物體發出螢光的顯微鏡。在螢光顯微鏡上,必須在標本的照明光中,選擇出特定波長的激發光,以產生螢光,然後必須在激發光和螢光混合的光線中,單把螢光分離出來以供觀察。因此,在選擇特定波長中,濾光鏡系統,成為極其重要的角色。
螢光顯微鏡原理: 
(a).光源:光源幅射出各種波長的光(以紫外至紅外)。 
(b).激勵濾光源:透過能使標本產生螢光的特定波長的光,同時阻擋對激發螢光無用的光。 
(c).螢光標本:一般用螢光色素染色。 
(d).阻擋濾光鏡:阻擋掉沒有被標本吸收的激發光有選擇地透射螢光,在螢光中也有部分波長被選擇透過
 

七、目鏡測微尺量測倍率比照表EYEPIECES MICROMETER COMPARISON TABLE

線狀 倍率 目鏡   一格單位(mm)  一格單位(μm)
  4X 10X 0.0250 mm 25.0 μm
  10X 10X 0.0100 mm  10.0 μm
  20X 10X 0.0050 mm 5.0 μm
  40X 10X 0.0025 mm  2.5 μm
  100X 10X 0.0010 mm  1.0 μm

 

格狀 倍率 目鏡 一格單位(長x寬) (mm)

一格單位(μm)

  4X 10X 0.25 mm x 0.25 mm  250 μm x 250 μm
  10X 10X 0.1 mm x 0.1 mm  100 μm x 100 μm
  20X 10X 0.05 mm x 0.05 mm  50 μm x 50 μm
  40X 10X 0.025 mm x 0.025 mm 25 μm x 25 μm
  100X 10X 0.01 mm x 0.01 mm  10 μm x 10 μm